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南宫28蛋白酶助您高效“玩转”蛋白质

来源:容芸功 日期:2025-03-27

南宫28的TurboTEV蛋白酶是一种改良的半胱氨酸蛋白酶,源自烟草蚀刻病毒(TEV)N1a蛋白催化片段。它能够特异性地识别并切割Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly序列中的Gln和Gly。TurboTEV蛋白酶在4°C下表现出极强的活性和稳定性,且不需要特定的缓冲液,可以在适合目标蛋白的缓冲液中使用,确保其高效运作。

南宫28蛋白酶助您高效“玩转”蛋白质

该蛋白酶的分子量为52kDa,带有GST和His标签,因而可以通过Ni螯合树脂或谷胱甘肽(GSH)树脂轻松去除剪切标签,使其在生物医学研究中的应用更加便捷。其活性来源于大肠杆菌,活性值超过10单位/µg,能够在30°C下有效裂解3µg底物的85%。

在使用南宫28的TurboTEV蛋白酶时,可以遵循以下步骤来确保最佳效果:

步骤1:准备新鲜的冰冷透析缓冲液,例如25mM Tris-HCl(pH 8.0)、150-500mM NaCl和14mM β-巯基乙醇。

步骤2:将目标蛋白样品稀释至1-2 mg/mL,并留出少量未切割样品以便后续分析。如果样品来自镍柱洗脱,可加入EDTA,浓度达到0.5 mM。

步骤3:加入TurboTEV蛋白酶,按照1:100(w/w)的比例混合。例如,100mg目标蛋白对应10000单位(1mg)的TurboTEV蛋白酶。

步骤4:在4°C下透析过夜(约16小时)。

步骤5:使用适当的柱子去除TurboTEV蛋白酶,并进行SDS-PAGE分析(可选)。

TurboTEV蛋白酶在生物医药领域具有广泛的应用前景,包括蛋白质裂解、从重组蛋白中去除融合标签以及蛋白质和肽的纯化等功能,成为许多科研人员的重要工具。

南宫28的TurboTEV蛋白酶能够有效提高实验的成功率,并且在优化反应条件时,避免使用1mM DTT、10%甘油、20mM组氨酸、500mM NaCl和100mM Tris等成分,以提升剪切效率。

总之,选用南宫28的TurboTEV蛋白酶,定能为您的生物医疗研究提供稳健的支持,帮助实现更高效的实验成果。

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