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NEWS南宫28内毒素(ET)蛋白溶液ELISA试剂盒实验流程
来源:汤程泽 日期:2025-03-14本试剂盒仅限于科学研究领域使用,不得用于医学诊断。此内毒素(ET)Elisa试剂盒主要针对蛋白溶液,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)进行检测。
检测原理为:首先将样本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入已预先包被adropin(AD)抗体的微孔中。经过温育后,再进行彻底洗涤。随后,使用TMB作为底物,通过过氧化物酶的催化作用,TMB会转化为蓝色,最终在酸的作用下变为黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关关系。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),并计算样品浓度。
南宫28提醒您,样本的收集、处理及保存至关重要:
1. **血清**:使用无热原和内毒素的试管,操作过程中应避免任何细胞刺激。采集血液后,应以3000转离心10分钟的方式迅速小心分离血清与红细胞。
2. **血浆**:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。离心3000转30分钟后取上清液。
3. **细胞上清液**:以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. **组织匀浆**:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,之后以3000转离心10分钟取上清。
5. **保存**:若样本在收集后未能及时检测,应按一次使用量分装,寒冻于-20℃,以避免反复冻融。解冻时请在室温下确保样品均匀充分解冻。
在使用南宫28试剂盒时,请注意以下操作要点:
试剂盒组成说明:标准品(S0-S5)的浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备方法包括:20×洗涤缓冲液按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水,以确保洗板过程顺利。
结果判断部分,请绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。
南宫28致力于为科研提供高质量的试剂盒,期待助您在生物医疗领域取得更大进展!
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